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新品| Mirus升級版CHO細胞高滴度瞬轉表達系統

CHO細胞是生產抗體類藥物廣泛應用的工程細胞,而CHO細胞瞬時轉染是新藥研發過程中必不可少的技術手段。為了用低成本在較短時間內表達出足量的目的蛋白,Mirus新推出了一款適用于懸浮CHO細胞瞬轉和蛋白高滴度表達的平臺——CHOgro? High Yield Expression System。相比于Mirus第一代CHOgro?表達系統,新版CHOgro?高滴度蛋白表達系統引入了效價增強劑(CHOgro? Titer Enhancer)組分,在確保操作流程精簡的同時,能夠大幅度提高瞬轉CHO細胞的蛋白產量。 更多>

NEW!專利產品Bambanker無血清即用型細胞凍存液

Bambanker無血清即用型細胞凍存液—給細胞更多的呵護 專利產品(專利號1347040) Serum-free for sensitive cell lines, like ES and primary cells, Gradual or programmable freezing is no longer necessary BAMBANKER產品特點 即用型細胞凍存液,無需程序性降溫 尤其適用于各類敏感細胞,如ES細胞、原代細胞 高復蘇率(請見對比圖效果) 可-80℃或液氮中長期凍存,穩定保存1年以上 無血清,成份確定,避免由支原體、病毒、朊病毒及其他病毒顆粒引發的污染 產品經無菌檢測,符合日本藥典 產品可2~8 ℃穩定保存2年 BAMBANKER操作流程使用說明: 收集對數生長期的細胞(5 x 105 ~ 1 x 107) 用1ml BambankerTM重懸細胞,置于凍存管中,無需預冷。 品名 貨號 規格 BambankerTM BB01 120ml BAMBANKER系列凍存液: 品名 描述 貨號 規格 BambankerTM Direct 細胞凍存時無需離心,非常適用于雜交瘤細胞 BBD01 20ml BambankerTM HRM 使用人血清白蛋白,無動物源性 BBH01 20ml BAMBANKER is manufactured by LYMPHOTEC Inc. BAMBANKER與其他相關產品的復蘇率效果比較 Bambanker使用發表文獻(部分) ü T. Hikichi et al., Differentiation potential of parthenogenetic embryonic stem cells is improved by nuclear transfer. Stem cells25, 46 (Jan, 2007). ü S. Mieno et al., Characteristics and function of cryopreserved bone marrow-derived endothelial progenitor cells. The Annals of thoracic surgery85, 1361 (Apr, 2008). ü S. Hatoya et al., Effect of co-culturing with embryonic fibroblasts on IVM, IVF and IVC of canine oocytes. Theriogenology66, 1083 (Sep 15, 2006). ü D. Liu et al., Relation between human decay-accelerating factor (hDAF) expression in pig cells andinhibition of human serum anti-pig cytotoxicity: value of highly expressed hDAF for xenotransplantation. Xenotransplantation14, 67 (Jan, 2007). ü S. K. Zaidi et al., Runx2 deficiency and defective subnuclear targeting bypass senescence to promote immortalization and tumorigenic potential. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America104, 19861 (Dec 11, 2007). ü S. Mieno et al., Effects of diabetes mellitus on VEGF-induced proliferation response in bone marrow derived endothelial progenitor cells. Journal of cardiac surgery25, 618 (Sep, 2010). ü Y. Shimizu et al., Impaired Tax-specific T-cell responses with insufficient control of HTLV-1 in a subgroup of individuals at asymptomatic and smoldering stages. Cancer science100, 481 (Mar, 2009). 更多>

Cali-Bio瓊脂糖Hg agarose低電內滲高分辨率低熔點

美國Cali-Bio公司新系列高品質瓊脂糖 NO.1 HgAgarose LE低電內滲瓊脂糖(綠色優選) 簡介:HgAgarose LE高純度低電內滲(Low EEO)多用途瓊脂糖,是“綠色”瓊脂糖,采用綠色環保原創工藝,生產全程不使用有機溶劑,減少對環境污染以及對操作者和樣品影響。 用途:DNA/RNA凝膠電泳與回收 使用方法:根據分離片段大小稱量對應的瓊脂糖,加入相應體積的緩沖液,微波爐高火至沸騰,保持沸騰30秒,取出后重懸未溶顆粒,再次用高火加熱1-2 分鐘,或直至瓊脂糖完全溶解。 HgAgarose產品特性 è 綠色環保工藝 è 高分辨率:讓您一目了然 è 低背景:給您清新視野 è 高強度凝膠:讓您操作輕松自如 è 低電滲:加快條帶移動為您節約實驗時間 è 穩定品質:使您的實驗結果良好重現 NO.2 HgAgarose LE, Tablets 片劑 性能比較 HgAgarose 片劑 其他粉劑 è采用綠色環保工藝的低電滲瓊脂糖 è傳統的有機溶劑生產工藝 è不用稱量 è需要稱量 è泡罩板包裝,易于分拆,存取和攜帶 è傳統瓶裝,不便于分拆,存取和攜帶 è避免溶解中瓊脂糖粉末掛壁現象 è很難避免溶解中瓊脂糖粉末掛壁現象 HgAgarose使用方法:加熱前,先將HgAgarose片劑在緩沖液中浸泡2-3分鐘使之完全崩解,后續操作和粉末瓊脂糖相同 NO.3 HgAgarose LM Agarose, Low Melting Point 低熔點瓊脂糖 簡介:改性工藝制得的低熔點瓊脂糖,凝膠結構更細致,具有更高的分辨率,低熔點(65℃以下),應用更加廣泛。 用途:DNA/RNA電泳與膠回收;凝膠內進行的酶促反應、組織培養、細胞克隆以及病毒空斑實驗; 使用方法:根據分離片段大小稱量對應的瓊脂糖,加入相應體積的緩沖液,微波爐中火至沸騰,保持沸騰30秒,取出后重懸未溶顆粒,再次用高火加熱1 分鐘,或直至瓊脂糖完全溶解。 HgAgarose產品特性 è 膠液更清澈, 強度較低,依然可以輕松操作 è 可以配制更高濃度的凝膠 è 更高的分辨率 è 很低的背景 è 穩定的品質 NO.4 HgAgarose HR Agarose, PCR Grade 高分辨率瓊脂糖 簡介:改良工藝制得的高分辨率瓊脂糖(High Resolution Agarose)對PCR 產物,小片段DNA 具有很高的分辨率,可以和聚丙烯酰胺相媲美,適宜分離與回收 20 bp - 800 bp DNA片段。 使用方法:根據分離片段大小稱量對應的瓊脂糖,加入相應體積的緩沖液,微波爐中火至沸騰,保持沸騰30秒,取出后重懸未溶顆粒,再次用高火加熱1 分鐘,或直至瓊脂糖完全溶解。 HgAgarose產品特性 極高的分辨率 膠液更清澈,較高的凝膠強度 可以配制更高濃度的凝膠 很低的背景 穩定的品質 HgAgarose系列瓊脂糖產品詳細參數: 產品名稱 HgAgarose LE HgAgarose LE Tablets HgAgarose LM HgAgarose HR CAS 9012-36-6 9012-36-6 39346-81-1 39346-81-1 外觀 白色粉末 白色片劑 白色粉末 白色粉末 EEO < 0.13 < 0.13 < 0.10 < 0.10 凝膠溫度 36°C±1.5°C (1.5% gel) 36°C±1.5°C (1.5% gel) 26°C-30°C (1.5% gel) <33°C (1.5% gel) 融膠溫度 88°C±1.5°C (1.5% gel) 88°C±1.5°C (1.5% gel) ≤65°C (1.5% gel) ≤70°C (1.5% gel) 凝膠強度 >1200 g/cm2 (1% gel) >1200 g/cm2 (1% gel) >200 g/cm2 (1% gel) >750 g/cm2 (1.5% gel) 溶解性 無色清澈膠液 無色清澈膠液 無色清澈膠液 無色清澈膠液 水分 ≤ 10% ≤ 10% ≤10% ≤10% 灰分 ≤ 0.5% ≤ 0.5% ≤0.5% ≤0.5% 硫化物 ≤ 0.15% ≤ 0.15% ≤0.10% ≤ 0.10% DNA酶和RNA酶 不得檢出 不得檢出 不得檢出 不得檢出 蛋白酶 不得檢出 不得檢出 不得檢出 不得檢出 核酸內切酶 不得檢出 不得檢出 不得檢出 不得檢出 HgAgarose產品訂購指南 英文名稱 中文名稱 貨號 HgAgarose LE, Multi-purpose 瓊脂糖,低電滲,普通電泳級別 CB300005 HgAgarose LE, Tablets 瓊脂糖,低電滲,普通電泳級別,片劑 CB300006 HgAgarose LM Agarose, Low Melting Point 瓊脂糖,低熔點 CB300007 HgAgarose HR Agarose, PCR Grade 瓊脂糖,高分辨率,PCR級 CB300008 GS DNA Dye, 10,000X in Water 綠色核酸標記染料,安全型EB替代物 CB300009 更多分子生物學產品可咨詢 Cali-Bio中國總代理-北京西美杰科技有限公司全國客服電話 400-050-4006 更多>

西美杰攜手Cygnus重磅推出HCP檢測特異性(抗原覆蓋率)驗證服務

試劑盒適用性(抗原覆蓋率)驗證服務簡介 生物制品中的宿主細胞殘留蛋白會導致過敏反應或潛在毒性等不良臨床反應風險。因此必須建立合適的HCP檢測驗證方法來嚴格控制生物制品的質量。目前生物制品行業多以商業化的通用型HCP ELISA試劑盒來檢測產品中的宿主蛋白殘留(如Cygnus Technologies)。但宿主細胞的分泌型蛋白和部分死亡細胞釋放的結構蛋白成分復雜,不同的工藝,加上相關基因產物需要經過獨特的翻譯后修飾,這些都大大增加了HCP的品種數量和生化復雜性。因此,通用型商品化HCP ELISA試劑盒中的多克隆抗體對宿主殘留蛋白的特異性問題很難進行評估。若商品化ELISA試劑盒中的多克隆抗體特異性和適用性不夠高,則會帶來漏檢HCP的風險,從而對生物制品質量安全帶來風險。 因此,世界各地的監管部門比如FDA,CFDA對生物制品企業使用的商品化HCP ELISA試劑盒需要提供相關證明,需要證明該ELISA試劑盒中使用的抗體與已知工藝流程中發現的大量HCPs可以廣泛反應,即試劑盒適用性或抗原覆蓋率驗證。在申報臨床實驗時每個企業都需要提供相關的數據來證明這一點,進而繼續進行接下來的研發工作。 目前,做此項驗證,被廣泛認知的方法是傳統2D-WB法,是基于等電點和分子量不同的原理,蛋白在凝膠上通過SDS-PAGE方法被分離。其中一張膠被銀染,另一張被轉到PVDF膜上,并結合ELISA試劑盒中的抗體進行Western Blotting檢測。兩張圖片通過電子手段進行疊加,然后由計算機分析覆蓋率。由于在實驗方法上存在一定局限性,有一些無法避免的缺陷。 2D-WB法的局限性 Ø 靈敏度低,只適用于上游樣品的分析; Ø 樣品需要經過變性處理,一些表位可能會被破壞而不能被抗體識別; Ø 銀染的膠與WB膜只能通過人工匹配操作,存在人為誤差; Ø 銀染與WB的靈敏度本身存在差異,導致可信度不夠高; Cygnus Technologies Inc.是美國的一家生物技術公司,該公司專注于為生物制藥和生物技術等企業提供高度專業化的用于研發和質量檢測過程中的分析產品。作為公認的生物污染物(例如宿主殘留蛋白HCP)檢測專家,Cygnus向全球客戶提供了不同種類經過嚴格驗證和廣泛識別的ELISA試劑盒和免疫分析試劑。同時,作為生物污染物分析中的企業,Cygnus還可以向客戶提供專業的專屬抗體及試劑盒開發和驗證等服務。具體服務項目包括試劑盒適用性(抗原覆蓋率)驗證服務和專屬性試劑盒開發服務。 Cygnus除了傳統的2D-WB的驗證服務以外,還獨家推出的更高特異性驗證方法,Cygnus還研發更高特異性檢測的方法:AAE(Antibody Affinity Extraction)。該方法在樣本處理方式上做了非常大的改進,能夠彌補2D-WB的缺陷,具有更高的特異性和靈敏度。 AAE新型驗證方法優勢 ü 獨特樣本處理方法:更高的靈敏度和特異性 ü 可用于純化后的樣本分析,真正反映試劑盒對工藝過程中或終產物中殘留的覆蓋率 ü 可直接通過儀器分析避免人工誤差,結果可信度更高 ü 已被多國監管機構認可,如CFDA、FDA、EMA 此外,Cygnus的專利抗體生產和親和純化技術能夠生產出高靈敏度和廣譜反應的多克隆抗體及相關試劑盒產品。還能為廣大的生物制品企業提供后續的專屬檢測產品的開發服務: 專屬HCP檢測抗體定制服務 Ø 提供全部項目報告 Ø 約5~6L抗血清 Ø 抗體親和純化的全部技術 專屬HCP試劑盒開發服務 Ø 完整的ELISA試劑盒開發及檢測報告 Ø 轉讓試劑盒生產工藝 Ø 提供試劑盒有效性鑒定的技術指導 北京西美杰科技有限公司(以下簡稱西美杰)作為Cygnus在中國總代理,在試劑盒開發和驗證服務中可為客戶提供一站式服務,包括服務技術咨詢,樣本申報清關寄送,服務進展查詢,服務報告整理接收等,大量節省了客戶的時間。西美杰已經成功為中國生物制藥多個客戶提供了滿意的HCP特異性驗證服務,助客戶高效臨床報批一臂之力。 西美杰現貨供應——Cygnus熱銷經典試劑盒 如CHO,E.coli,Pichia pastoris,Vero,293等細胞株HCP檢測試劑盒 Protein A檢測系列 DNA殘留等檢測試劑盒及相關試劑 如您對工藝過程中的各類生物污染物檢測產品或者服務感興趣,請撥打全國服務熱線400-050-4006進行咨詢。 更多>

如何選擇合適的通用CHO HCP檢測試劑盒

Cygnus眾多產品中,CHO HCP殘留檢測試劑盒自上市以來,不僅得到廣大使用者的認可,更得到了各地藥品監管部門,如美國FDA,中國CFDA的認可,為企業產品申報節省了大量時間與金錢。目前,Cygnus CHO HCP檢測試劑盒已經發展到第三代產品(F550)。這三款試劑盒之間到底有什么樣的區別?初次進行HCP研究的人員該怎么樣選擇合適的試劑盒?下面將對不同試劑盒進行比較分析,并給出選擇建議。三款試劑盒有什么區別和聯系?F015第一代CHO HCP檢測試劑盒。F015是Cygnus在20多年前開發的第一款CHO HCP檢測試劑盒, CHO細胞經過溫和裂解后,將此裂解液作為免疫原。同時,抗體的親和純化和試劑盒標準品的制備所用材料都來源于此裂解液。這個裂解的過程產生了一系列HCP,這些HCP與收獲產品時細胞培養基中的HCP極為相似。CM015第二代CHO HCP檢測試劑盒。繼F015試劑盒上市2年后,Cygnus推出了CHO HCP檢測第二代產品CM015。由于大部分由CHO細胞表達的產品會分泌到培養基中,CM015試劑盒采用conditioned media作為原材料進行抗體的開發,所以以這種培養基為免疫原研發出的抗體或試劑盒要比細胞裂解液特異性更強。F550第三代CHO HCP檢測試劑盒。直至今日,Cygnus的第三代F550 CHO HCP檢測試劑盒已經得到了來自全球使用者的認可。與CM015類似,F550同樣采用conditioned media進行抗體的生產。然而,較前兩代試劑盒,這次Cygnus研發團隊憑借多年的抗體研發和親和純化經驗,生產出的抗體具有更廣泛的反應性。同時,抗體還用不同方法,如Antibody Affinity Extract(AAE),對抗體的覆蓋率進行了分析。所以,對于絕大部分樣品,F550是目前可更廣泛與不同樣品反應,并能提供更準確檢測結果的試劑盒。CHO HCP檢測試劑盒選擇與驗證對于特定的產品或者樣品類型,在沒有前期驗證的情況下,沒有人能夠預測哪個試劑盒更適合。因為F550抗體的生產和試劑盒的研發采用的是最新的技術,并且抗體對于大部分樣品中HCP能夠更廣泛的反應,所以建議新的使用者首先測試這個試劑盒。在選擇了一款試劑盒后,需要做一系列的驗證實驗來驗證試劑盒適用于我們的樣品及工藝。通常的驗證實驗包括抗體覆蓋率的驗證、稀釋線性、準確度、精確度、定量限等驗證。Cygnus專利技術Antibody Affinity Extract(AAE)方法覆蓋率的驗證從靈敏度、特異性等方法較傳統的2DWB提高了很多,檢測的結果能更真實反應覆蓋率。其他HCP ELISA試劑盒方法學驗證模板以及AAE覆蓋率分析方法介紹和比較等文件,請詳細北京西美杰科技有限公司獲取。Cygnus是美國一家專注于為制藥和生物技術企業工藝研發和質量管理中提供專業分析產品及解決方案的公司。產品線覆蓋廣泛,包括針對多種不同宿主的HCP檢測試劑盒,適用不同填料的Protein A檢測試劑盒,滿足不同實驗需求的宿主DNA殘留檢測試劑盒,其他生物過程中污染物殘留檢測試劑盒,以及針對特殊樣品和工藝的專屬抗體和試劑盒定制服務等。北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國總代理,與國內眾多知名藥企,CRO/CMO企業建立了長久穩定的合作關系。多年來西美杰的產品及服務幫助許多企業加速R&D階段,提高藥物質量、純度和安全,加速優化研發工藝,減少產品上市時間,降低QC成本。如您的產品涉及特殊樣品或表達系統,西美杰還可以為您定制專屬于您的產品的解決方案和驗證服務。歡迎致電西美杰400-050-4006或者登陸網站www.navneetnewshouse.com了解更多信息。 更多>

疫苗生產降血清培養方案推薦|西美杰科技

隨著國家藥品監督管理部門對藥品生產監管力度越來越大,生物制藥和疫苗生產企業對產品安全性管理要求越來越高,在疫苗生產過程中采用無動物源成份的原輔料是日益增長的要求趨勢,但目前,絕大部分疫苗生產還離不開細胞培養過程中血清成份的添加,但使用血清,必須面對血清帶來的系列問題和缺點: 1.     批間差較大:每批血清可能適合某些細胞系,換血清批號要做廣泛實驗,大量儲存提高成本,且很難實現大規模生產過程的標準化,也在一定程度上影響疫苗的批次穩定性; 2.     污染風險:血清常受病毒污染,雖對多數細胞培養無害,但增加了不能控制的因素,一旦出問題,需要耗費相當大的時間、物資和人力成本去解決; 3.     不確定性:血清中含有廣泛的未知微量成分,對其存在的作用還遠未搞清楚,也增加了純化和疫苗質量控制的難度; 4.     高成本:高質量血清供應不足,全球血清趨緊,且價格仍不斷上升,成本往往是細胞培養基成本的數倍,給疫苗生產企業帶來相當大的成本壓力; 因此,如何降低血清在疫苗生產中的用量,從而減少使用血清帶來的風險和高成本,是疫苗生產企業廣泛關注且努力尋找解決方案的重要問題。 與傳統的高血清含量細胞培養相比,采用低血清細胞培養方式,不僅能夠降低疫苗安全性風險,還能提高企業生產效率,使用低血清培養基進行疫苗生產,細胞經馴化適應后,與傳統培養方式相比,細胞數量提高,細胞長滿單層時間大大縮短,分種比例、病毒滴度也有所提高,同時減少勞動強度,從而大大提高企業的生產效率,重要的是,降低了疫苗生產企業的綜合成本。 北京西美杰科技有限公司(以下簡稱西美杰)為疫苗客戶引進培養基營養添加物供應商——KERRY,其高品質的植物源蛋白水解物、復合非動物源性添加物系統、超濾酵母粉、重組低內毒素白蛋白服務于全球疫苗生產企業、培養基生產企業近70年,為廣大疫苗客戶很大程度上解決了血清帶來的困擾。目前在國內,KERRY系列產品已經廣泛應用于疫苗生產的BHK、VERO、SF-9、MDCK、MRC5等細胞株中,上市疫苗品種有:口蹄疫疫苗、戊肝疫苗、流感疫苗等,血清使用量已經從從10%降低到3%,少數客戶已經實現了完全無血清培養。 使用KERRY Sheff-VAX系統用于VERO細胞降血清馴化案例 圖1. Vero細胞生長形態對比。(A)對照組:10%胎牛血清;(B):實驗組:0%胎牛血清+2g/L Sheff-VAX ACF。根據觀察,A對照組中的Vero細胞和B實驗組的細胞沒有不同。所有圖片都是用100X萊卡顯微鏡拍攝。圖2. 以Vero細胞在含有10%的胎牛血清的培養基中生長曲線為對照組,對比細胞在逐漸減少血清的情況下加入Sheff-Vax添加物進行細胞穿戴。DMEM作為基礎培養基。 (i)10%胎牛血清; (ii)7.5%胎牛血清; (iii)5%胎牛血清; (iv)2.5%胎牛血清; (v)1.5%胎牛血清; (vi)1%胎牛血清; (vii)0.5%胎牛血清; (viii)0.25%胎牛血清; (ix)0.1%胎牛血清; (x)0 %胎牛血清。 用逐漸減少血清的方法,可以實現Vero細胞的無血清培養。在同樣的培養基時間內,有添加物培養基中的細胞可達對照組細胞密度峰值的一半。但通過延長培養時間,可獲得更高的細胞密度峰值。 推薦疫苗生產細胞培養添加物系列產品介紹: 1. 非動物復合添加物Sheff-VAX系列 PF為無蛋白,plus為含微量元素 2. 非動物源Hypep系列 3. 其他相關產品 由于低血清培養基在成分配比上與基礎培養基有所不同,其培養液的pH、滲透壓及碳酸氫鈉添加量等有所改變,以及細胞生長速度、分種比例、收毒時間及次數等都與用戶以往的經驗和習慣不同,在使用低血清培養基時,容易給用戶造成一定的困難。因此,要使用好低血清培養基,用戶必須打破以往形成的使用習慣,以一種全新的姿態來認識低血清培養基。我們可以提供以上產品的試用裝,用于您工藝優化小試,如果您對以上產品感興趣,歡迎聯系KERRY細胞營養產品中國代理——西美杰。 除以上產品以外,西美杰還是其他全球生物炸彈藥原輔料與服務商的中國總代理或一級代理,目前我們提供的原輔料已經被國內數百家生物制藥企業,包括國內知名的人用、獸用疫苗企業廣泛使用。除降血清方案的細胞營養添加物以外,還涉及上游細胞培養原料,宿主殘留檢測產品與驗證服務,過程污染物檢測產品、高純低內毒素海藻糖、蔗糖等輔料等一站式系列產品和服務。如您對以上任何產品感興趣,歡迎致電400-050-4006聯系我們,在北京,上海,成都,重慶,武漢,廣州,深圳等各地都有我們公司當地市場銷售人員為您服務。 更多>

海藻糖新型生物分子保護劑

海藻糖簡介 海藻糖(Trehalose)也被稱作α-D-吡喃葡萄糖基α-D-吡喃葡萄糖苷,由于兩個吡喃葡萄糖環的連接發生在糖基的還原末端(α-carbons),不會輕易地被酸水解,并且糖苷鍵不會被α-糖苷酶分解,所以海藻糖是具有很強的穩定性非還原性雙糖。海藻糖的研究已經有近百年的歷史,自發現以來,不斷從對外界惡劣環境表現出非凡抗逆耐受力的物種中發現海藻糖的存在,從而發現了海藻糖對生物體具有神奇的保護作用,是因為海藻糖在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環境條件下在細胞表面能形成獨特的保護膜,有效地保護蛋白質分子不變性失活,而后更多的研究將海藻糖應用到了食品、化妝品、藥品、生物制品的工藝中。 海藻糖在生物制品中的應用 在生物制品的凍干保護劑的制劑過程中,糖類是重要的一類輔料,比如蔗糖、甘露醇、甘露糖、山梨醇、麥芽糖等,其中蔗糖是在生物制品中使用廣泛,但由于國際藥用輔料協會對生物制品的質量、安全性日趨提高的要求,尋找更好的生物大分子保護穩定劑,提高生物制品的穩定性和質量是各大生物制藥公司不斷追尋的目標。迄今為止,在國際上,海藻糖已經陸續被使用到各類生物制品的凍干保護中,比如國際重磅生物炸彈藥,比如Herceptin®,Adcetris®,Avastin®,Lucentis®,Advate®,Gazyva®,Blincyto®,當中就使用了海藻糖作為核心的凍干保護劑,另外,也在越來越多的人用疫苗中,比如MenAfrivac,DengVaxia,HepB (ShanVac),Influenzae (DPIV),MMR等開始使用海藻糖替換血清白蛋白作為保護劑,可以常溫條件下干燥存放,不僅可以避免疫苗因為非冷鏈運輸導致的失效問題,而且還能防止因為血源污染導致的乙肝、艾滋病等致命疾病的傳播。 海藻糖相比蔗糖具有更加優質保護作用的原因 表1. 海藻糖和蔗糖物理性質比較 性質 海藻糖 蔗糖 Solubility (g/100 g H20, at 20°C) 40.6-68.9« 200 Melting temperature (°C) 210-215 188 Glass transition temperature (Tg, °C) 110-120 65-75 Relative viscosity 1.85 1.3 # Equatorial -OH 8 46 Diffusion coefficient (cm2/s) 1.91 x 10-8 5.89 x 10-8 Density (g/cm3, at 25°C and 85°C) 1.58,1.41 1.59,1.37 Hydration number 11 8 Rate of hydrolysis (s_1, at 25°C) 3.3 x l〇-15 5.0 x l〇-n Stability in extreme pH (% remaining) >99% ^0% at pH 3-4 Acrylamide formation 0 mg/mol Asn 98 mg/mol Asn Calcium dissolution in phosphate buffer 24 ppm 6 ppm Sweetness 45% 100% 1. 高玻璃態轉變溫度(Tg) 在不同的干燥或失水過程中,包括冷凍干燥和噴霧干燥,海藻糖可輕易地干燥為非晶體材料,并具有高玻璃態轉變溫度(Tg>100°C)[12,3]。不同文獻中報道的Tg有所不同,導致不同結果的原因是由于不同的檢測條件,其中最重要的因素是殘余水分含量。Crowe等人所報道的在殘余水分含量為0.3%時,Tg為111.3°C[4]。隨著水分的增加,Tg降低,這是水的增塑作用導致的。盡管如此,在含水量相似的情況下,海藻糖的Tg值高于蔗糖(圖1)。 圖1. 海藻糖和蔗糖玻璃態轉變溫度(Tg)與含水量(wt%)的相關性[4,5]。 2. 水解穩定性 水解速率對活性生物制品的穩定有著深遠的影響,因為還原性單糖,如葡萄糖,易于發生美拉德反應(或褐變反應)。海藻糖對于水解的穩定性是因為海藻糖中的糖苷鍵具有較低的能量(<1 kcal/mol)[5,6],而蔗糖中糖苷鍵的自由能更高(27 kcal/mol),二水化合物晶體的水解溫度高達97°C[7,8],而且在弱酸存在的情況下,蔗糖更易于水解產生葡萄糖和果糖,而海藻糖在ph3.0的情況下仍然非常穩定。在另一項研究中,在沒有酸催化的條件下,海藻糖的水解速率也明顯低于蔗糖:在25°C時,分別為3.3 ×10?15 s?1和5 × 10?11 s?1[9]。這兩種糖類水解速率和溫度的相關性如圖2所示,而且研究表明這些速率不隨pH和離子強度的變化有顯著改變。此外,有文獻報道蔗糖在冷凍過程中可發生水解,然而海藻糖并沒有類似的報告[10-12]。 圖2. 海藻糖和蔗糖水解速率比較。0.1 M PBS(pH8.1),溫度范圍100°C -240°C[9]。 3. 低吸濕性 與此同時,在一些應用中,如片劑制劑,相對于其他糖類,結晶態海藻糖還有一個優勢,即他低吸濕性,從而促進藥片粘性的降低和穩定性的提高。在海藻糖和蔗糖不同物理性質的比較中,這些性質的不同大約是由于它們構象柔性不同所導致的。大多數二糖,構象受單糖殘基間的分子內氫鍵影響。結晶態下的海藻糖,不存在直接的分子內氫鍵[13],而在蔗糖內就存在這樣的氫鍵[14]。盡管如此,海藻糖內還是存在間接的通過水分子表現的分子間氫鍵[13-15],平均鍵長相對較短(1.825 Å)。因此,相對作用較強[16]。對于海藻糖和蔗糖,環氧原子的角度分別是114.1°和116.1°,而糖苷氧原子的角度分別是115.8°和114.4°[13-17]。這兩種糖類的其他結晶學數據可在這些文獻中找到[13,16-18]。 圖3. 不同糖類晶體狀態下吸水性。25°C,相對濕度90%[19]。 4. 高水合性 海藻糖還有一個明顯的特點就是具有較高數量的Equatorial –OH基團,這使海藻糖在水溶液中有更強的相互作用,并更容易把它自己包含在水分子簇中。相反的,蔗糖不能很好的把自己整合在水分子簇中,從而造成了更大的結構[20]。事實上,相對于海藻糖,蔗糖更不容易與水結合。(圖4)這一特點的實際意義說明,對于基于蔗糖的配方,在低含水量(如<1%)時,含海藻糖配方更不容易水解。 除以上原因外,兩種糖類的性質的不同也可能是由于分子間氫鍵數量的不同導致的(尤其是在高濃度下)。海藻糖只形成一個這樣的鍵,而蔗糖會形成兩個,因此,對于海藻糖會有更多空閑的位點與水分子的氫鍵結合,從而導致了更高的水合數量[21,22]。隨著海藻糖濃度(5-90wt%)的增加,水合數量遞減(大約從13到3)。圖4中的這種減少是由于犧牲糖分子附近的水分子造成的,迫使它們通過增加分子內氫鍵的方式減少對氫鍵的需求。這種方式形成了一種折疊的構象,進而減少水合數量[21-24]。紅外線光譜和激光拉曼光譜等技術用來驗證蔗糖分子糖苷鍵周圍的折疊情況,然而這種構象的改變在海藻糖中沒有發現[26]。 圖4. 海藻糖和蔗糖水合數量與糖類濃度(wt%)相關性[21] 5. 更低的水擴散系數和更高的粘性 海藻糖和蔗糖的物理性質比較說明了,雖然密度相似,海藻糖具有更低的水擴散系數和更高的粘性[21]。所有性質之間都是緊密聯系的。隨著密度增加,自由體積減少,所以擴散性降低,粘性增加[26]。蔗糖的擴散系數要高于海藻糖,尤其是在高濃度的情況下:74wt%糖濃度,蔗糖和海藻糖的擴散系數分別是5.89 × 10?8和1.91 × 10?8 cm2/s。更快的擴散系數是由于蔗糖具有更小的水合數造成的。因為水合的蔗糖在尺寸上更小,所以它更易擴散。然而,在低濃度時,系統中水分子相對顯著增多,涉及其中的糖類并不敏感,所以沒有發現擴散性的不同。隨著系統中糖類流動性限制的增加,粘性預計會增加。事實上,Sola-Penna和Meyer-Fernandes[27]的研究表明海藻糖粘性高于蔗糖,并且在更高的濃度下,差距增加。圖5中這說明在具有高濃度蛋白的應用中,含海藻糖的配方具有更高的整體粘性。 圖5. 濃度范圍在0-1 M,海藻糖和蔗糖相對粘性[25]。 另外,在細胞凍存,細胞培養等方面,海藻糖也有相對一般糖類同樣具有非常明顯的優勢,如果您對這方面內容感興趣,歡迎關注西美杰公眾號(xmjsci)后期推送內容,或者致電西美杰客服熱線400-050-4006進行咨詢。Pfanstiehl高純低內毒素注射級海藻糖 美國Pfanstiehl Inc.專注研發與生產注射級高純度低內毒素海藻糖,并且符合USP,EP,JP,ChP等多國藥典。產品在FDA備案,DMF為激活狀態,在FDA批準的含海藻糖產品中,100%的海藻糖都來自于Pfanstiehl。作為Pfanstiehl在中國區代理商——北京西美杰科技有限公司,將Pfanstiehl高品質的糖類產品帶給廣大客戶解決生物制品凍干保護作用難題的同時,也一直致力于為客戶提供高品質的售前售后服務,關注和陪伴國內生物制藥企業一起成長,我們現階段正在積極響應CFDA的輔料關聯審評工作,配合使用我們產品的企業盡早通過審評。如需進行產品咨詢,請直接聯系Pfanstiehl中國代理-北京西美杰科技有限公司(熱線電話400-050-4006)。 更多>

常用蛋白酶抑制劑/緩沖液系列推薦 | PanReac Applichem

蛋白酶抑制劑系列常用緩沖液 其他常用試劑 德國PanReac Applichem公司成立于1992 年,是歐洲生物化學試劑與制藥原料生產商之一,德國PanReac Applichem公司通過ISO9001:2008 質量體系認證。 德國PanReac Applichem公司已成為全球科研、知名CRO 企業、大型制藥、診斷、食品、化妝品等工業的重要供應商,被稱為“歐洲小Sigma”。 德國PanReac Applichem公司作為全球多家培養基生產企業和制藥企業長期固定供應商, PanReacAppliChem 因其20 幾年來杰出的產品服務品質和市場業績, 德國PanReac Applichem公司于2012 年被美國ITW ( Illinois Tool Works Inc)集團公司收購,德國PanReac Applichem公司為客戶提供更加強大的服務支持。 PanReac AppliChem品牌優勢 1. 產品種類眾多:現有產品4000 多種; 2. 覆蓋領域廣泛:化學、生物化學、免疫學、分子生物學、細胞生物學、診斷、制藥、食品等; 3. 產品級別豐富:包含常規純級、分析純級,生化級,更有超純級、HPLC 級、食品級、分子生物學級、細胞培養級和藥典級,可滿足不同應用的原料質量需求; 4. ISO 驗證:保證產品質量及其批間穩定性; 5. 性價比高:使用優品質產品的同時為您節省大量成本。 除以上蛋白檢測系列產品以外,PanReac Applichem還有系列實驗室污染清除預防系列,比如細胞培養支原體污染檢測、預防、清除Myco系列,PCR假陽性污染清除預防DNA-ExitusPlus。 北京西美杰科技有限公司是PanReac AppliChem在中國的授權總代理,合作10多年,成熟的服務體系和現貨庫存,為國內廣大客戶提供了非常便捷的服務。 如您對以上產品感興趣歡迎撥打西美杰全國客服熱線400-050-4006,或者登陸官方網址www.navneetnewshouse.com查詢產品詳細信息。 更多>

糖類輔料應用多多,你都知道嗎?

藥用輔料一般是指在生物制劑配方中包含的非活性成分,雖然是非活性成分,但藥用輔料往往具備賦形,成型,增溶,助溶等作用,甚至會影響藥效,藥品質量和安全性等方面。所以,藥用輔料在整個制藥過程一直受到各制藥企業的重視。藥用輔料同時需要達到較高的標準才可在生產中使用,如高純度,低內毒素,符合多國藥典標準,以及ICH(International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use)特定標準等。 糖類輔料是藥用輔料中被廣泛使用的一類輔料,如海藻糖,蔗糖,半乳糖,甘露醇,甘露糖,麥芽糖,山梨醇等。蔗糖由于獨特的性質,一直被用于蛋白的穩定劑及細胞培養過程當中。近年來,研究人員對海藻糖的研究逐漸增多,由于海藻糖的大規模生產和純化技術的發展以及海藻糖在熱穩定性等方面都優于蔗糖,海藻糖成為各制藥企業最常用到的用于穩定蛋白的糖類輔料。對于糖類輔料在最終制劑配方中的使用大家已經熟知,而近幾年對糖類輔料研究的不斷深入,發現這些常規的輔料在制藥的其他階段,如細胞培養,純化等階段,都有不同的應用。本篇文章主要就是匯總一些近些年關于糖類輔料在生物制藥過程中的新應用,希望可以給制藥公司研發人員提供一些新思路。 1.海藻糖在細胞保存中的應用 細胞的低溫保存是生物制藥過程中重要的一個環節,細胞保存的好壞影響著復蘇后細胞的活性和狀態,最終將影響蛋白的產量。DMSO(二甲基亞砜)是科研及工業中常用的細胞凍存時使用的防凍劑,可以有效的防止冷凍過程中細胞內形成冰晶。但DMSO問題就是其具備較高的毒性,這不僅會對細胞造成一定影響,嚴重威脅著使用者的身體健康。好消息是,研究表明由于海藻糖的特殊性質,海藻糖也可用于細胞凍存,而且效果不比使用DMSO差。一些大型先進的制藥企業,已經在內部嘗試使用海藻糖代替DMSO進行細胞凍存。實驗數據證明,逐漸降低DMSO用量,增加海藻糖用量對細胞進行凍存處理,在復蘇后,細胞狀態和活性與完全使用DMSO進行凍存無任何差異。這些企業現在也正在積極嘗試摸索完全使用海藻糖代替DMSO進行凍存的條件,相信這項技術會使使用者不再被DMSO這種毒性試劑所困擾。 2.海藻糖在細胞培養中的應用 在治療性抗體的生產過程中,經常困擾著眾多企業的就是這些抗體的聚集現象。抗體蛋白的聚集可導致蛋白大小,可逆性,溶解度,結合能力,構象的改變,這些結構上的變化直接導致蛋白滴度及免疫性的降低。而且,這些結構變化還會導致新的抗原表位出現,導致了不在預期之內的免疫反應的發生。最近一項研究表明,實驗人員在CHO細胞培養過程中分別使用含海藻糖和不含海藻糖培養基去培養細胞,隨著培養時間的推移,在某一時間點,無海藻糖培養基中的活細胞密度急劇下降至接近0,而含海藻糖培養基中的活細胞密度始終保持穩定。另一方面,含海藻糖培養基表達蛋白的濃度也是一直高于不含海藻糖培養基中的表達。同時,對這兩個不同培養基中表達蛋白mRNA進行Real-time PCR的結果也是如此。這種現象是因為海藻糖在細胞生長過程中充當一種具抗聚集作用的化學分子伴侶,同時海藻糖在這個過程中還可以穩定細胞膜和蛋白,使細胞活性提高,進而增加目的蛋白產量。因此,該研究為提高治療性抗體產品質量提供了一個切實可行的方案。 3.海藻糖在純化過程中的應用 海藻糖這種抗聚集的作用不僅可以應用于細胞培養階段,同時還可應用于純化階段。純化柱的制備是影響蛋白純化的核心,好的純化柱對可以保證最大程度去除雜質,這樣可以保證最終藥物蛋白的藥效和安全性。然而,純化柱不是可以一直使用的,由于損耗,需要隨時更換新的純化柱。而海藻糖使得蛋白聚集現象大幅降低,這樣無形中延長了純化柱的使用壽命,使時間和成本大幅降低。大致估算海藻糖的應用可以使純化柱壽命延長三分之一左右。 4.半乳糖在細胞培養中的應用 葡萄糖和谷氨酰胺一直作為細胞培養基中的主要碳源和能量來源,但由于培養基中葡萄糖和谷氨酰胺代謝速度過快,并且這個過程中大量積累乳酸和銨,抑制細胞功能,使得培養效率變得非常低。為了克服這一阻礙,研究人員嘗試使用半乳糖和谷氨酸鹽替換以上兩種成分。結果表明更換為半乳糖和谷氨酸鹽后,乳酸和銨的積累明顯降低,并且極大延長了培養基培養時間,這種方法為細胞培養提供了一個更有效的方案。在實際應用中,許多企業已經在使用半乳糖來替換葡萄糖了。Pfanstiehl Inc.于1919年在美國伊利諾伊州成立,一百多年的研發生產經驗使其成為專業化生產高品質藥用糖類輔料的企業。Pfanstiehl代表產品有海藻糖,蔗糖,半乳糖等,產品具備高純度,低內毒素,注射級藥用輔料,符合包括中國藥典在內的多國藥典標準以及ICH Q3D金屬元素標準。同時,為了配合CFDA關于藥包材藥用輔料與藥品關聯審評政策,Pfanstiehl積極配合制藥企業進行關聯審評,現階段Pfanstiehl海藻糖和蔗糖均提交了關聯審評材料,并且獲得海藻糖關聯審評受理號。 北京西美杰科技有限公司作為Pfanstiehl中國代理商已經成為中國地區眾多生物制藥與疫苗企業的供應商,同時,西美杰會繼續為中國客戶提供更多的產品與服務,讓企業在原輔料篩選,產品生產與質檢,申報等工作中節省人力,資金,時間。 更多>

Alzet滲透壓泵常見問題解答

西美杰提供的Alzet&reg;滲透壓泵給藥方案,采用埋植法給藥,不僅能長時間勻速給藥,還可大大減少動物實驗的操作頻次,降低動物應激反應,讓實驗重復性更好。今天我們來聊聊關于Alzet&reg;滲透壓泵在使用中的一些常見問題。 1. 100μl容量Alzet泵如何連接給藥導管? 當其他規格的Alzet泵(如200μl或2ML容量)連接給藥導管時,只需將泵體導流管的帽子取下即可,但100μl容量的給藥泵(1003D、1007D、1002和1004)因體積所限,在設計時泵體帽子與導流管是固定在一起的,因此需要采用其他方法取下泵體帽子,如下圖所示。 操作步驟: 1) 拔出泵體導流管,用小剪刀輕輕剪開并移除上端白色的帽子,由于導流管是不銹鋼材質,注意不要彎曲或擠壓; 2) 將導流管一端連接給藥管或腦部注射針導管(I.D.≤0.76mm或0.03 inches),兩者重疊約4mm左右。多數給藥實驗可采用 PE-60(I.D.=0.03 inches)聚乙烯管(Cat#0007750); 3) 連接好給藥管后,將不銹鋼導流管輕輕插回泵內; 4) 該方法僅針對100μl容量的Alzet泵,其他大容量規格的泵體帽子是可拆卸的,連接給藥管前只需將帽子取下即可。 2. Alzet泵內的不銹鋼導流管是什么作用? 導流管對于Alzet滲透壓泵是必不可少的,主要作用包括三個: 1) 當泵內腔被填滿后,插入導流管可除去泵內殘留的空氣,如果泵內有殘留氣泡會導致滲透壓泵無法正常輸出藥物; 2) 導流管限制了泵內藥物的擴散,確保了滲透壓泵更穩定的控制藥物輸出速率; 3) 導流管是泵內腔的最佳支撐物,使泵內腔在滲透壓作用下不會被擠壓變形,確保腔內藥物能正常輸出。 3. 核磁共振(MRI)實驗可以用嗎? Alzet滲透壓泵也可在MRI實驗中應用,只需將泵內的不銹鋼導流管更換為PEEK材質的導流管即可。不同Alzet泵型號對應PEEK導流管如下: PEEK管特點: 已經過無菌處理; 根據Alzet泵型號裁切,能完全契合泵體; 極佳的耐化學腐蝕性能; 生物兼容性好; 10個/包規格。 此外,我們還可提供不含金屬部件的腦部注射針,方便做腦部給藥的MRI實驗。 4. 給藥泵填充藥物的注意事項有哪些? 向泵內灌注藥物的過程中如遇到阻力,說明泵腔內空氣排出困難,可以把灌流針向一側輕輕頂一點,只要保證泵內空氣能正常排出,藥物能灌入就可以,力度要適度避免把泵腔戳破,灌流針必須要用盒內配套的針頭,注射器盡量用小規格的,灌藥之前需確保注射器和灌流針頭內都沒有氣泡。 5. Alzet泵植入動物體之前如何預啟動? 所有Alzet滲透壓泵在實現有效給藥之前都需要一段啟動時間,這個啟動階段是泵體鹽夾層充分吸收液體和預熱所需的時間。我們可以在植入動物體之前,通過預啟動來完成這一步驟。通常,以下幾種情況需要對Alzet泵進行體外預啟動。 植入動物體后要立即給藥 泵體連接導管給藥 藥物黏性較大 可能有急性毒性作用的藥物 Alzet泵體預啟動步驟: 1) 按操作手冊要求向泵內填充藥物; 2) 在植入動物前,先將裝好藥物的泵體浸泡在無菌生理鹽水或PBS中37℃孵育至少4-6h(過夜最好)。 (以下幾個型號泵的預啟動時間要格外注意:2004需要40h,2006需要60h,2001D需要3h,1004需要48h) 3) 如果連接了給藥導管,注意將導管末端遠離預處理的緩沖液,以防液體混入導管內; 4) 預啟動時藥物有可能從導管溢出,但由于蒸發作用,流出的藥物不易被觀察到,為了避免藥物流失,需盡快將預啟動好的滲透壓泵植入動物體內。 6. Alzet滲透壓泵的有效期是多久? Alzet滲透壓泵有效期是7年,在干燥室溫環境中保存,避免高熱或極端條件。正常保存效期內的Alzet泵能確保給藥時間和給藥速率的穩定性和精確度。 7. 氰基丙烯酸酯粘合劑的應用有哪些? Loctite 454(Cat#0008670)是一種專為ALZET&reg;腦部給藥裝置設計的一種膠狀粘合劑,其用途和優點如下: 1) 即用型粘合劑,無需預混; 2) 每支3g,足夠>10次的腦部給藥裝置固定; 3) 替代顱骨造形術/補齒水泥的更便捷方案。 8. 多個滲透壓泵同時給藥怎么操作? 某些給藥實驗需要在一只動物體內同時埋植多個滲透壓泵,包括以下幾種情況: 1) 實現多種不能混合藥物的聯合給藥; 2) 提高單一泵的給藥速率; 3) 利用給藥導管實現多靶點給藥; 4) 輸注溶解度過低的藥物。 埋植多個Alzet泵必須確保動物體重足夠大,能容納多個泵的大小和重量。下表總結了埋植2個指定型號給藥泵時動物要滿足的最小體重。 9. 皮膚縫合器的用途是什么? AutoClip和Reflex兩款皮膚縫合器能幫助研究者完美高效的縫合傷口,簡化手術流程,節省寶貴時間,讓Alzet給藥泵的埋植過程更快捷。其中,帶9mm縫合夾的AutoClip適用于大鼠,帶7mm縫合夾的Reflex適用于小鼠。當傷口愈合后,還能利用Remover快速拆除縫合夾。整套皮膚縫合器都可高壓滅菌處理。 10. 所有問題的終極解決方案 仔細閱讀說明書!仔細閱讀說明書!仔細閱讀說明書! 重要的事情說三遍^_^ 西美杰作為Alzet授權代理已十年有余,為國內廣大客戶引進了便捷、科學的給藥方案,我們始終承諾為用戶提供完善的技術支持與售后服務。如果您對Alzet的產品感興趣,歡迎撥打我們的服務熱線400-050-4006免費索取Alzet緩釋給藥系統相關的技術資料。 更多>

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北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡稱西美杰)于2006年成立,由留美歸國生物領域專業人士創辦。西美杰堅持自己的經營理念,勤奮踏實地整合全球產品資源與技術資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產企業提供一站式產品服務方案,幫助科研及企業單位縮短科研時間... 更多>

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